Cytotoxicity and genotoxicity of intravitreal adalimumab administration in rabbit retinal cells / Citotoxicidade e genotoxicidade da administração de adalimumabe intravítreo nas células da retina de coelhos

Purpose: To assess the cytotoxicity and genotoxicity of intravitreal adalimumab treatment in an animal experimental model using cytological and molecular techniques. Methods: Eighteen rabbits were randomly assigned to three groups: control, adalimumab treatment, and placebo. Cytotoxicity on retinal cells was evaluated using flow cytometry assays to determine the level of apoptosis and necrosis. Genotoxicity was evaluated by comet assays to assess DNA damage, and quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) was used to evaluate expression of apoptosis-inducing caspases (8 and 3). Results: No cytotoxicity or genotoxicity was observed in any of the two treatment groups (adalimumab and placebo) following intravitreal administration compared with the control group. Flow cytometry analysis revealed that more than 90% of the cells were viable, and only a low proportion of retinal cells presented apoptotic (~10%) or necrotic (<1%) activity across all groups. Molecular damage was also low with a maximum of 6.4% DNA degradation observed in the comet assays. In addition, no increase in gene expression of apoptosis-inducing caspases was observed on retinal cells by qPCR in both the adalimumab and placebo groups compared with the control group. Conclusion: The use of adalimumab resulted in no detectable cytotoxicity or genotoxicity on retinal cells for up to 60 days upon administration. These results therefore indicate that adalimumab may be a safe option for intravitreal application to treat ocular inflammatory diseases in which TNF-α is involved. .

Objetivo: Acessar a citotoxicidade e genotoxicidade do tratamento intravítreo de adalimumabe em um modelo experimental animal utilizando técnicas citológicas e moleculares. Métodos: Dezoito coelhos foram aleatoriamente selecionados em três grupos: controle, tratamento intravítreo com adalimumabe e placebo. Os efeitos tóxicos nas células da retina foram avaliados através de ensaios de citometria de fluxo, para a determinação de atividade apoptótica e necrótica. A genotoxidade foi avaliada através de ensaios cometa para determinar danos ao DNA e através de PCR em tempo real para avaliar a expressão genética de caspases (8 e 3) promotoras de apoptose celular. Resultados: Não foram detectadas citotoxicidade e genotoxidade nos dois grupos de tratamento, adalimumabe e placebo, em comparação com o controle. A citometria de fluxo determinou que mais de 90% das células eram viáveis após o tratamento, e uma pequena quantidade de células da retina apresentaram apoptose (~10%) ou necrose (<1%) em todos os grupos. O dano molecular também foi baixo com uma degradação no DNA de no máximo 6,4% detectados nos ensaios cometa. Adicionalmente, não foram observados aumentos na expressão genética das caspases que induzem a apoptose através dos ensaios de PCR em tempo real. Conclusão: O tratamento intravítreo com adalimumabe não promoveu nenhuma citotoxicidade e genotoxicidade detectável em células da retina por até sessenta dias. Estes resultados, portanto, indicam que o adalimumabe pode ser uma opção segura para o tratamento de doenças oculares inflamatórias em que o TNFα está envolvido. .

Eficácia do uso intraoperatório de mitomicina C na cirurgia do pterígio: análise de 102 casos / Eficacy of intraoperative use of mitomycin C pterygium surgery: analysis of 102 cases

OBJETIVO: Avaliar a eficácia e a segurança do uso intraoperatório da mitomicina C (MMC) no tratamento cirúrgico do pterígio. MÉTODOS: Estudo de 102 pacientes (204 olhos) divididos em dois grupos, e submetidos a exérese do pterígio com rotação de retalho conjuntival e aplicação intra-operatória de MMC 0,02% por 2 minutos e a mesma técnica utilizando solução salina a 0,9% (grupo controle). Os pacientes foram avaliados no 1º, 7 º, 21º, 30º, 60º e 90º dia de pós-operatório (PO). RESULTADOS: Houve um maior acometimento do pterígio no sexo feminino (59,9%). A idade variou entre 33 a 69 anos. As recidivas (9) no no grupo MMC foram identificadas no 90º PO. No grupo controle foi identificado 18 recidivas em 60 dias de pós-operatório. As complicações identificadas no grupo da MMC foram: ceratite, edema de pálpebra, deiscência de sutura, isquemia, granuloma, corneal dellen e simbléfaro. CONCLUSÃO: O uso da MMC foi útil na redução da taxa de recidiva do pterígio, comparada ao uso de solução salina, porém seus efeitos deletérios devem sempre ser avaliados.

PURPOSE: Measure of efficacy and the security of intraoperative of mitomycin C (MMC) in the pterygium surgery. METHODS: Realized prospective analysis of 102 patients (204 eyes) divided in two groups submitted intraoperative MMC 0.02 % for 2 minutes or saline solution 0.9%. The patients were available in 1º, 7 º, 21º, 30º, 60º and 90º days of postoperative. RESULTS: The pterygium was more prevalence in females (58,33%). The age various 33 to 69 years. The recidive (9) was in the 90º PO in the group of MMC. In the control group was identificated two recidives in 60 days. The complications found in MMC group were: ceratitis, lips edema, dehiscence of suture, ischemia, granuloma, corneal dellen and simblefaro. CONCLUSION: The use of MMC was useful in reducing the rate of recurrence in pterygium compared to the use of saline solution, but its harmful effects must always be evaluated.